类风1湿因子（rf）同样能干扰捕获包被法测定igm抗1体，导致假阳性反应。因此中和igg的间接法近来颇受青睐，用这类试剂检测抗cmv iggm和抗弓形虫igm抗1体已获成功。
2.2.7 abs-elisa法
abs为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白，分子量60000，每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物，分子量244。用化学方法制成的衍生物素-羟基琥珀酰亚1胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物，标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强的特异性，其亲和力较抗原抗1体反应大得多，两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与4个生物素分子结合，因此如把abs与elisa法可分为酶标记亲和素-生物素（lab）法和桥联亲和素-生物素（abc）法两种类型。两者均以生物素标记的抗1体（或抗原）代替原elisa系统中的酶标抗1体（抗原）。在lab中，固相生物素先与不标记的亲和素反应，然后再加酶标记的生物素以进一步提高敏感度。在早期，亲和素从蛋清中提取，这种卵亲和素为碱性糖蛋白，与聚本乙烯载体的吸附性很强，用于elisa中可使本底增1高。从链霉菌中提取的链霉亲和素则无此缺点，在elisa应用中有替代前者的趋势。由于abs-elisa较普通elisa多用了两种试剂，增加了操作步骤，在临床检验中abs-elisa应用不多。
(5) 加0.2m赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。+ \0 y( i* k3 j
m+ ]
(6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1小时。
(7) 3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15m ph7.4的pbs中。6 s* w9 j f v4 n9 r- a+ ~
(8) 将上述溶液装入透析袋中，对0.15m ph7.4的pb缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
3）结果判定：5 l5 y
n% b0 a* v t2 w5 b. \) b
(1) 定性及效价滴定：用特异性抗原(或抗1体)同酶标记抗1体(或抗免疫球蛋白抗1体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色，可初步鉴定其活性。最后以直接elisa法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。
elisa法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传1染病、寄1生虫病及非传1染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为elisa法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血1清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗1体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此elisa法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，

---