1 产品概述
ecl试剂，即化学发光法辣根过氧化物酶（hrp）底物，是目前western blotting检测中最为灵敏的试剂。目前市场上普通ecl试剂在使用过程中经常出现易淬灭、高背景、不稳定以及低丰度蛋白难以检测等问题，影响最终实验结果。
翊圣生物根据现状，集中免疫检测领域的优秀科研人员，在严格控制鲁米诺原料的基础上，不断改良增强剂和稳定剂配方，针对不同需求开发了4类ecl试剂，包含增强型、超敏型、持久型和最高灵敏度型产品，不仅可满足实验者对目的蛋白从低丰度到高丰度表达的检测要求，同时可在不影响实验的条件下，提高发光强度，使您获得的图像更加清晰。
卓越的灵敏度——皮克至低飞克级的抗原检测
更高的信噪比——精准发光底物，降低背景
更利节省抗体——优化底物系统，更高抗体结合力
优异的性价比——更高的性能，更低的价格
极佳的稳定性——新型氧化剂，常温下稳定保存1年
2 产品原理
ecl试剂检测的核心原理为氧化反应发光：鲁米诺（lumino）作为发光底物的主要成分，在碱性条件下，通过辣根过氧化酶（hrp）催化，被h2o2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子，最大发射波长为425 nm，光子信号可通过x射线胶片或ccd成像仪被捕获。
3 选择指南
翊圣目前拥有的4种ecl产品，各具特色，能够完全满足用户的免疫印迹应用需求。
那么，您的实验应该选择哪一种产品呢？
表1 ecl试剂选择指南
yeasen enhanced ecl
增强型 super ecl
超敏型 superdura
持久型 maxisignal
最高灵敏度型
适用样本 靶点丰度较高，常规蛋白样本 靶点丰度低，样本有限 靶点丰度较低，样本有限 靶点丰度极低，样品珍贵
检测灵敏度 中等皮克级 低皮克级 中等飞克级 低飞克级
信号持续时间 < 2 h < 12 h < 24 h < 8 h
适用检测系统 所有试剂均适用x射线胶片，ccd成像仪
一抗稀释浓度 1:1000-1:4000 1:1000-1:10000 1:1000-1:50000 1:5000-1:100000
二抗稀释浓度 1:1000-1:4000 1:2000-1:10000 1:50,000-1:250,000 1:100,000-1:500,000
推荐用膜 nc膜 nc膜或pvdf膜 nc膜或pvdf膜 nc膜或pvdf膜
存储稳定性 室温1年 室温1年 室温1年 4℃ 1年，室温半年
优势 同一级别灵敏度中信号蕞强 性价比最高，适用于多数wb实验 最长信号持续时间，极其适用于多次曝光 卓越灵敏度，极其适用于痕量蛋白检测
【注】：推荐抗体稀释浓度为抗体储液浓度为1 mg/ml时的稀释浓度。
4 产品应用
yeasen ecl试剂对比其他品牌同级别产品具有更佳的使用效果。
图1 yeasen ecl超敏型底物super与品牌t同级别底物pico检测效果比对
图2 yeasen ecl最高灵敏度型底物maxisignal与品牌t同级别底物west femto检测效果比对
图3 yeasen ecl持久型底物superdura与品牌t同级别底物west dura检测效果比对
5 客户好评
1） 中国医学科学院药物研究所
yeasen
品牌m
图4 yeasen ecl超敏型底物super相对品牌m同级别底物crescendo，检测灵敏度更高
2）中国药科大学
图5 yeasen ecl超敏型底物super相对品牌t同级别底物pico，检测灵敏度更高，结果重现性更好
3）上海交通大学医学院
图6 使用yeasen ecl增强型底物enhanced检测目的蛋白，获得清晰锐利的条带
6 使用yeasen ecl底物发表的文献
[1] ren c f, zhao y x, hou c f, et al. expression of soluble programmed death-1 protein in peripheral blood regulatory t cells and its effects on rheumatoid arthritis progression[j]. molecular medicine reports, 2017, 15(1): 460-466.
[2] zhu t, zhao y, wu y, et al. the staphylococcus epidermidis gdps regulates biofilm formation independently of its protein-coding function[j]. microbial pathogenesis, 2017, 105: 264-271.
7 价格优势
yeasen致力于为您提供性价比最高的产品。
图7 yeasen ecl产品与其他品牌同级别产品价格比对
8 常见问题
遇到的问题 原因分析 推荐解决方法
胶片出现反影 反应系统中hrp量过多 稀释hrp标记物
胶片出现棕色或黄色条带
荧光猝灭
操作时间过长，膜逐渐干掉 避免膜干掉
保鲜膜、显影液或定影液污染 养成良好的实验习惯
反应系统中hrp量过少 增加hrp标记物
胶片无条带显现或者信号较弱 转膜的效率低 提高转膜效率，用预染marker判断。
抗原、抗体量少或不匹配 增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体
x光胶片有问题 曝光后x光谱全黑（而非透明色），则表明胶片已完全曝光，使用新的x光片
显影/定影液有问题 可预先曝光一张胶片进行判断，如有问题当换用新的显影/定影液
反应系统中hrp量过多 稀释hrp标记物
高背景 一抗二抗浓度太高 降低抗体浓度，延长封闭时间
抗体未清洗干净 增加洗膜次数
封闭不完全 优化封闭条件
使用错误的封闭剂 使用其他的封闭剂
过度曝光 降低曝光时间
抗体特异性差 更换优质抗体
反应系统中hrp量过多 稀释hrp标记物
条带有空斑 抗原以及二抗的浓度过高 稀释样品重新跑胶，也可将混合好的显色液冰浴后，加到膜上即刻快速显色。
带型不规则 转膜有气泡或甲醇（对于pvdf膜）水化不均匀 优化转膜条件。
胶片出现斑点 hrp标记物聚集体 0.2μm膜过滤hrp标记物
非特异性条带 反应系统中hrp量过多 稀释hrp标记物
sds引起蛋白非特异性结合 实验流程中不使用sds
抗体特异性差 更换优质抗体
封闭不足 增加封闭时间或使用其他封闭剂
9 订购信息
产品名称 货号 规格 价格
super ecl detection reagent化学发光超敏显色试剂盒 36208es60 100 ml 395.00
36208es76 500 ml 1655.00
enhanced ecl chemiluminescent substrate kit
增强型ecl化学发光检测试剂盒 36222es60 100 ml 325.00
36222es76 500 ml 1255.00
supersignal superdura extended duration substrate
持久性化学发光底物 36223es10 10 ml 267.00
36223es60 100 ml 1557.00
36223es70 200 ml 2857.00
36223es76 500 ml 5257.00
supersignal maxisignal maximum sensitivity substrate
最高灵敏度化学发光底物 36224es10 10 ml 287.00
36224es60 100 ml 1757.00
36224es70 200 ml 3257.00
36224es76 500 ml 5857.00
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