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液相色谱仪检测法揭开“罗丹明b”神秘毒纱
冬天来了,随着气温的不断下降,火锅店的生意逐渐火爆起来。在寒冷的冬夜,约三五好友,吃吃火锅,驱寒暖胃;谈谈心事,增进情谊;也算是为严酷的冬日增添了几分柔情暖意。
看着锅中翻腾着的鲜红辣椒汤料,嗅着弥漫在空中鲜美的味道,乐享火锅美味。殊不知,这汤料中美艳的小红辣椒、鲜香的靓汤却有可能暗藏毒素—罗丹明b。早在2011年,国家质检局就在“火锅之都”重庆的一家火锅店的火锅底料中,检验出有害物质“罗丹明b”。
罗丹明b与苏丹红是“近亲”可致癌
罗丹明b又称玫瑰红b,是一种人工合成碱性荧光染料,与苏丹红(一种红色染料,用于为溶剂、油、蜡、汽油增色以及鞋、地板等的增光,具有致癌性)是“近亲”。一般用作实验室中细胞荧光染色剂,是一种具有鲜桃红色的人工合成的工业染料。
2008年,我国将其列入第一批《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中,明确规定不允许用作食品添加剂及食品染色。由于罗丹明b具有价格低廉、色泽红艳、稳定性强等特点,部分不良商贩将其作为苏丹红替代品为花椒、辣椒等食品染色,取得好的卖相,并用于火锅店和麻辣烫等餐饮服务单位的火锅底料、火锅调味料、辣椒粉、辣椒油中。
研究显示,罗丹明b会直接危害到人体的健康,具有潜在的致癌、致突变性和心脏毒性。如果添加在火锅里,会让火锅的颜色变得鲜艳、好看,但是肉眼识别是很困难的,也没有特殊气味,所以普通市民很难分辨出是否添加了罗丹明b。
那么该如何检测罗丹明b呢?国家食品质监局主要采用高效液相色谱仪进行分析检测。主要是固相萃取小柱对样品进行萃取浓缩净化处理,再用高效液相色谱法一荧光检测器测定食品中罗丹明b含量。以辣椒油为例,简析液相色谱分析方法。
苏丹明b实验室检测方案
检测仪器:高效液相色谱仪(双泵、紫外/可见光检测器),
检测条件:色谱柱:c18 4.6mm x 15cm(5μm)
进样量:5ul
流动相:75%甲醇水溶液 1ml/min
检测器: 紫外/可见光(uv/vis)检测器;波长:550nm
定性定量:罗丹明b标准溶液保留时间定性,外标法定量。
样品制备:称取辣椒油1.0g,加5ml乙腈磷酸水溶液温热溶解,超声提取30min,再加5ml正己烷充
分混匀,置于离心机中,以4000r/min离心10min,弃去上清液,除去油溶性色素,再加5ml正己烷重复一次。下层液体在氮气流下吹至约1ml,加1ml水混匀,用于固相萃取柱净化。
样品纯化:固相萃取柱用3ml甲醇活化,用3ml水平衡后,将上清液注入固相萃取柱,依次用3ml水、12ml
50%甲醇水溶液淋洗,用6ml 80%甲醇水溶液洗脱,收集洗脱液,置于50℃水浴中,使用氮气吹干。用1ml甲醇溶解残渣,经有机相滤膜过滤,即可供高效液相色谱仪测定。
检测色谱图:
注意事项:在本法所给分离条件下,样品基质在罗丹明b附近无干扰峰,其他许多红色偶氮染料均可在罗
丹明b之后出峰,注意调整这些干扰峰与罗丹明b分离度,干扰的成分为:苏丹橙g、对位红、苏丹红7b、苏丹红ⅰ、苏丹红ⅱ、苏丹红ⅲ、苏丹红ⅳ。
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