- 品牌:robustnique
- 外观性状:
- 酶系活力:
- 温度适用范围:
- 产品标准:
- 保质期:其他
概述:
pfu dna聚合酶是从克隆有pyrococcusfuriosus dna聚合酶基因的大肠杆菌中分离出来的。pfu dna聚合酶有3´→5´外切酶的活性,它能纠正dna扩增过程中产生的错误,是目前已发现的所有天然耐热dna聚合酶中出错率最低的(1)。
来源:
e.coli菌株,包含有从pyrococcusfuriosus中克隆的基因(2)。
应用:
1. 常规pcr。
2. 基因的高保真pcr,克隆和表达。
3. 反转录pcr (rt-pcr)。
4. 平末端pcr克隆。
5. 定点突变。
反应条件:
10× pfu dna聚合酶反应缓冲液 (包括 20 mmmgso4) [200 mm tris-hcl (ph 8.8 @ 25°c),100 mm(nh4)2so4,100 mm kcl,1mg/ml无核酸酶活性的bsa,1% triton x-100 (v/v),20 mmmgso4]。
质量检测:
核酸外切酶活性:在50 µl反应体系中,10 u本酶与0.2mm dntps和1 µg的hind iii消化的λdna于37°c温育4小时,电泳条带无明显变化。
核酸内切酶活性:在50 µl反应体系中,10 u本酶与0.2 mm dntps和1µg的puc19质粒于37°c温育4小时,电泳条带无明显变化。
纯度:经sds-page (考马斯亮蓝染色) 检测其纯度大于95%。
质保声明:
pfu dna聚合酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
在72°c下反应30分钟,能催化10nmol的dntps聚合为多核苷酸片段的酶量定义为1个活性单位 (u)。
参考文献:
1. lunberg, k.s. etal. 1991. high-fidelity amplification using a thermostabledna polymerase isolated frompyrococcus furiosus. gene.108:1-6.
2. sambrook, j. et al. 2001. molecularcloning: a laboratory manual, (3rd ed.), cold springharbor laboratory press.
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