蛋白a蛋白g琼脂糖凝胶ff
品  名
蛋白a蛋白g琼脂糖凝胶ff
英文名
protein ag nupharose fast flow, protein ag nupharose ff
目录号
nrpb13s(预装柱)
规  格
                               1 ml预装柱，5 ml预装柱，10 ml预装柱
运  输
2 ~25℃，常压、避光
贮  存
20%乙醇，2 ~8℃
保质期
3年
相关介绍：
蛋白a蛋白g琼脂糖凝胶ff是将重组蛋白a蛋白g融合蛋白（r-pag，nrpa14s）键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和分离介质。与单独的蛋白a或蛋白g分离介质相比，具有更宽广的结合范围，可以与人的所有igg亚型、iga、ige、igm结合，但不能与小鼠的iga、igm和血清白蛋白结合，适合用于鼠igg单抗的提取和检测。同时融合后的r-pag降低对ph的依赖，允许在ph5 ~8进行结合。
技术指标：
基质
4%交联琼脂糖凝胶微球
配基
蛋白a蛋白g融合蛋白
配基密度
≥6 mg/ml
填料粒径
60 ~180 μm
最大流速
800 cm/h
推荐流速
20 ~100 cm/h
ph稳定性
ph 3 ~9，ph2 ~10（清洗）
耐反压
0.3 mpa
载量
≥ 20 mg/ml igg
保存条件
2 ~8℃保存于20%乙醇溶液中
应用举例：
结合缓冲液：20 mm磷酸缓冲液，150 mm nacl，ph 7.4
洗脱缓冲液：0.1 m glycine-hcl缓冲液，ph 2.5
中和缓冲液：1 m tris-hcl，ph 9.0
1) 1ml蛋白a蛋白g琼脂糖凝胶ff预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；
2) 用结合缓冲液结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积；
3) 将3 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释到15 ml，0.45μm滤膜过滤上样；
4) 用结合缓冲液再洗 5 ~ 10个柱床体积；
5) 用洗脱缓冲液洗脱抗体，收集洗脱峰，并用中和缓冲液调节其ph至中性；
6) 目的抗体洗脱后用结合缓冲液清洗5 ~ 10个柱体积平衡柱子；
7) 分析洗脱下来的兔多抗。
注意事项：
1) 预填柱使用简易方便，在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务；
2) 样品洗脱后一般ph很低，应立刻用碱性中和缓冲液（如1 m tris-hcl，ph9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，或在收集容器中事先装5% ~ 10%、ph 7.5的缓冲液（如1 m tris-hcl或1 m磷酸缓冲液），以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活；
3) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，如果已经产生气泡，可以自行重装柱子；
4) 多次使用后会有沉淀蛋白，强疏水性蛋白，脂蛋白，脂质体等非特异吸附凝胶上，可以用0.1 %去垢剂短时间清洗，如0.1% tritonx-100清洗2个柱体积，立即用结合缓冲液洗5 ~ 10个柱体积。也可以用70%乙醇清洗作同样清洗。
推荐流速
预装柱体积
1 ml
5 ml
10 ml
流速(ml /min)
0.2
1
2
5) 
种类
species
亚型
antibody class
蛋白a
protein a
蛋白g
protein g
蛋白a蛋白g融合蛋白
protein ag
人
human
igg1
igg2
igg3
igg4
igm
igd
iga
fab
+++
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+
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+
-
+
+
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-
-
-
+
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+++
+++
+
-
+
+
小鼠
mouse
igg1
igg2a
igg2b
igg3
igm
+
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-
++
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-
++
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-
大鼠
rat
igg1
igg2a
igg2b
igg2c
+
-
-
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++
+++
+
+++
++
+++
+
+++
牛
cow
igg1
igg2
+
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+++
+++
+++
+++
山羊
goat
igg1
igg2
+
+++
+++
+++
+++
+++
马
horse
igg(ab)
igg(c)
igg(t)
+
+
-
-
-
+++
+
+
+++
兔rabbit
igg
+++
+++
+++
猪pig
igg
+++
+
+++
狗dog
igg
+++
+
+++
鸡chicken
igy
-
-
-
-表示不结合；+表示微弱结合；++表示中等结合；+++表示很强结合。

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