1、载体根据消毒对象选择相应的材料，如手术器械选择不锈钢片，物体表面选择棉布片，非金属管腔选择聚四氟乙烯片（管），光滑表面可选择玻璃片等。常用的材料有金属、玻璃、滤纸、棉布、聚四氟乙烯等，金属载体一般用 12mm 直径圆形金属片（厚 0.5mm），其他材质载体一般为方形，大小 10mm×10mm，特殊试验可使用其他材质、形状的载体。评价气体、雾化等消毒方式时，不可使用布片和滤纸片等有吸附能力的载体。
     2、所用载体（除滤纸片外）于染菌前，进行脱脂处理。脱脂方法如下：①将载体放在含碱性洗涤剂的水中煮沸 30min；②以自来水洗净；③用蒸馏水煮沸 10min；④用蒸馏水漂洗至 ph 呈中性；⑤晾干、熨平备用。
     3、布片用 40织纱的白平纹棉布制作。将脱脂后的布块按载体规定的大小抽去边缘一周的经纬纱各一根，按抽纱痕剪开。金属片以不锈钢制作，纸片以滤纸制作。
     4、 载体经压力蒸汽灭菌后，使用滴染法染菌。
     5、 染菌用菌悬液：菌悬液和芽孢悬液的制备按上述6进行，然后加入等量 3.0% 或 0.3% 的牛血清白蛋白。
     6、 滴染法染菌时，将经灭菌的载体平铺于无菌平皿内，用移液器逐个滴加菌液，必要时用接种环涂匀整个载体表面。置 36℃±1℃ 恒温培养箱或者室温干燥备用，黑曲霉菌染菌载体置于二级生物安全柜内干燥备用。
     7、 每个染菌载体的回收菌量为 1×106cfu/个～5×106cfu/个。特殊染菌载体（如压力蒸汽灭菌生物指示物）的回收菌量符合相应标准的要求。
     8、 染菌载体冷藏保存，芽孢载体有效期1个月，其他染菌载体当天使用。