目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。dna 合成仪有很多种，无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。
亚磷酰胺三酯法合成 dna 片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将 dna 固定在固相载体上完成 dna 链的合成的，合成的方向是由待合成引物的 3 端向 5 端合成的，相邻的核苷酸通过3→5 磷酸二酯键连接。
引物纯化方式有哪些，要如何选择？
用途：定量pcr, snp检测，基因检测，表达分析，dhplc，恒温扩增，基因检测，感染等
脱盐(dsl)：又称为简易反相柱，氨盐可以被有机溶液洗脱，但不会被水洗脱，能有效的去除盐分，纯度可满足大多分子生物学实验需求。
优点：速度快，价格优，通量大。
缺点：该方法不能有效去除比目的片段略短的引物小片段。
这种方法一般不会对普通 pcr 反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。
opc 纯化： opc 纯化是根据 dna 保护基和 cartridge 柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的 dna 片段。opc 法纯化的 dna 纯度大于 95%。适用于 40 mer 以下引物的纯化。
page纯化：page纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对dna 片段进行分离，然后从凝胶中回收目的dna的方法。纯化后的 dna 纯度大于 95%，对长链 oligo dna (大于50mer)的纯化特别有效。
高效液相(hplc)：采用高效液相色谱的原理，对引物dna进行纯化是一种非常有效的纯化方式，能达到很高的纯度和灵敏度。纯化后，引物的纯度可大于90% 。特别适合用于短链(小于40 mer)引物和修饰引物的纯化。
优点：对纯化短链引物(<40 mer)特别有效。
缺点：成本高，批量生产效率不高。
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