本次分享来自第一届兽医检测诊断大会(上海),澳大利亚动物健康实验室的大卫•威廉姆斯。笔者摘取其中诊断和检测技术,供大家参考。
part 1
非洲猪瘟诊断病原学技术
1、非洲猪瘟的实验室诊断程序
对于急性疾病的爆发,病毒检测(pcr)最有用,血清学诊断价值较低,因为大多数猪在抗体反应前死亡,在7-10天内;但是如果存在幸存的猪只,特别是asfv转变为中等毒力或者弱毒力毒株之后,抗体检测的作用凸显;
2、抗体检测------ 一般考虑因素
• 由于没有疫苗,抗体的存在表明当前或过去的感染
• 抗体出现较早(7-10 dpi),可在幸存者中持续数年
• 然而,在急性期或急性感染中,猪只常在产生可检测到的抗体之前死亡。因此,在疫情调查中也应采集样本进行病毒检测
• 抗体不能完全中和
• 建议进行以下血清学检查:
– elisa作为一种筛选工具
– 间接荧光/过氧化物酶抗体试验(ifa/ipx)或免疫印迹(ib)确认
3、抗体检测的样品类型
• 血清
• haemolysis à false positives in elisa
• 溶血 à elisa假阳性
• 血浆
• 猪肉浸出液,组织渗出物
• 口腔液
• 取样方便,无创
• ab水平低于全血或血清
• 干血(滤纸或拭子):方便取样和储存(例如在偏远地区或没有冷链时);ab水平低于全血或血清
4、抗体检测-取样技术
• 优点
• 快速测试与解释
• 高通量、自动化
• 缺点
• 在监测研究中,ipx/ifa的敏感性低于ipx/ifa,可能代表的血清价偏低;当使用质量差的样品时,其特异性容易降低;确认性测试很重要,如果可能的话
6、口腔液的诊断潜能:
• 唾液和血清中含有抗体和病原体的混合物
• 作为猪病原体的另一种诊断样本
• 比如prrsv, pcv2, influenza, asfv
• 在圈中采样时,代表群(组)样本
• 成本效益高、简单、安全、“福利友好”、劳动强度较低
• 有潜力对大量猪群进行有效监测
总结:
• 一系列血清学技术可用来可靠地检测抗体的asfv
• 建议与病毒检测方法一起使用,但在急性asf暴发中,血清学的诊断价值较低
• 最常用的elisas; se的不同水平
• ifa/ipx测定的se最高,但主要用于参考实验室的确认
• 其他样本类型可用于抗体检测(例如血样、口腔液、组织渗出液)