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NADH氧化酶(NOX)测试盒 常量可见分光光度法 说明 技术 文章

2023-12-29 7:16:04发布次查看发布人:

nadh氧化酶(nadh oxidase,nox)试剂盒商品货号:qs1004
英文名称:nadh oxidase(nox) assay kit
别名:nadh氧化酶试剂盒 nox kit nadh氧化酶(nox)试剂盒 nadh氧化酶(nox)测试盒
检测方法:常量法
商品货号:商品品牌:规格基本售价选择规格
qs1004-50管/48样   50管/48样 ¥450.00元  
测定意义: 
nox(ec 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将nadh氧化为nad。该酶不仅参与nad的再生,而且与免疫反应密切相关。
测定原理:
nox能够将nadh氧化为nad,nadh的氧化与2,6二氯酚靛蓝(dcpip)的还原相偶联,蓝色的dcpip被还原为无色的dcpip,在600nm下测定蓝色dcpip的还原速率计算出nadh氧化酶活性的大小。
货号:qs1004                                                      规格:50管/48样
nadh氧化酶(nadh oxidase,nox)试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
nox(ec 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将nadh氧化为nad。该酶不仅参与nad的再生,而且与免疫反应密切相关。
测定原理:
nox能够将nadh氧化为nad,nadh的氧化与2,6二氯酚靛蓝(dcpip)的还原相偶联,蓝色的dcpip被还原为无色的dcpip,在600nm下测定蓝色dcpip的还原速率计算出nadh氧化酶活性的大小。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:液体50ml×1瓶,-20℃保存。
试剂二:液体10ml×1瓶,-20℃保存。
试剂三:液体1ml×1瓶,-20℃保存。
试剂四:液体50ml×1瓶,4℃保存。
试剂五:液体6 ml×1瓶,4℃保存。
试剂六:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入5ml蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃
       保存,禁止反复冻融。
样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1ml试剂一和10ul 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。将匀浆600g,4℃离心5min。弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的nox(此步可选做)。步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200ul试剂二和2ul 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200w,超声3s,间隔10秒,重复30次),用于nox活性测定。血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
分光光度计预热30min以上,调节波长至600nm,蒸馏水调零。样本测定(1)试剂四、试剂五和试剂六于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min。
(2)在1ml石英比色皿中加入40μl样本、700μl试剂四、100μl试剂五和160μl试剂六,混匀,记录600nm处20s时吸光值a1和 1min20s后的吸光值a2,计算δa=a1-a2。
nox活力单位的计算:
1、血清(浆)nox活力的计算:
单位的定义:每ml血清(浆)在每ml反应体系中每分钟a600变化0.01定义为一个酶活力单位。
nox(u/ml)=δa×v反总÷v样÷0.01÷t=2500×δa
2、组织、细菌或细胞中nox活力的计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白在每ml反应体系中每分钟a600变化0.01定义为一个酶活力单位。
nox(u/mg prot)=δa×v反总÷(v样×cpr)÷0.01÷t=2500×δa÷cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
(2)按样本鲜重计算:
单位的定义:每g组织在每ml反应体系中每分钟a600变化0.01定义为一个酶活力单位。
nox(u/g 鲜重)=δa×v反总÷(w× v样÷v样总)÷0.01÷t=505×δa÷w
(3)按细菌或细胞密度计算:
单位的定义:每1万个细菌或细胞在每ml反应体系中每分钟a600变化0.01定义为一个酶活力单位。
nox(u/104 cell)=δa×v反总÷(500×v样÷v样总)÷0.01÷t=1.01×δa
v反总:反应体系总体积,1ml; v样:加入样本体积,0.04ml;v样总:加入提取液体积,0.202 ml;t:反应时间,1 min;cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;w:样本质量;500:细胞或细菌总数,500万。
辅酶ⅰ系列        
qs1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 500
ms1000 辅酶ⅰnad(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 920
qs1001 乳酸脱氢酶(ldh)测试盒 可见分光光度法 50管/24样 170
ms1001 乳酸脱氢酶(ldh)测试盒 微量法 100管/48样 330
qs1002 nad-苹果酸脱氢酶(nad-mdh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1002 nad-苹果酸脱氢酶(nad-mdh)测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1003 nadp-苹果酸脱氢酶(nadp-mdh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1003 nadp-苹果酸脱氢酶(nadp-mdh)测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1004 nadh氧化酶(nox)测试盒   可见分光光度法 50管/48样 450
ms1004 nadh氧化酶(nox)测试盒   微量法 100管/96样 850
qs1005-50 柠檬酸合酶(cs)测试盒 可见分光光度法 50管/48样 3200
qs1005-25 柠檬酸合酶(cs)测试盒 可见分光光度法 25管/24样 2000
ms1005 柠檬酸合酶(cs)测试盒 微量法 100管/48样 3500
qs1006 丙酮酸脱羧酶(pdc)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 720
ms1006 丙酮酸脱羧酶(pdc)测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1007 醇脱氢酶(adh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 280
ms1007 醇脱氢酶(adh)测试盒 微量法 100管/96样 550
qs1008 单脱氢抗坏血酸还原酶(mdhar)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 800
ms1008 单脱氢抗坏血酸还原酶(mdhar)测试盒 微量法 100管/96样 1550
qs1009 乙醛脱氢酶(aldh)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 420
ms1009 乙醛脱氢酶(aldh)测试盒 微量法 100管/96样 800
qs1010 nad激酶(nadk)测试盒 可见分光光度法 50管/48样 600
ms1010 nad激酶(nadk)测试盒 微量法 100管/48样 1100
qs1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒    紫外分光光度法 25管/24样 1280
ms1011 线粒体呼吸链复合体ⅰ/nadh-辅酶q还原酶测试盒    微量法 100管/96样 2500
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