一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
冰冻切片机 thermo cryotome e
载玻片 servicebio
盖玻片 江苏世泰实验器材有限公司 10212432c
脱色摇床 servicebio tsy-b
涡旋混合器 servicebio mx-f
掌上离心机 servicebio d1008e
移液枪 dragon ke0003087/ka0056573
组化笔 gene tech gt1001
冰箱 青岛海尔股份有限公司 bcd-192tgn
正置荧光显微镜 日本尼康 nikon eclipse c1
成像系统 日本尼康 nikon ds-u3
2、主要实验试剂
试剂 厂家 货号 稀释比
oct包埋剂 sakura 4583
pbs缓冲液 servicebio g0002
ros染液 servicebio g1045
dapi servicebio g1012
抗荧光淬灭封片剂 servicebio g1401
二、冰冻切片免疫荧光实验步骤
1、染色：冰冻切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在
圈内滴加ros染液，避光恒温箱37°孵育30min。
2、dapi复染细胞核：玻片置于pbs（ph7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每
次5min。切片稍甩干后在圈内滴加dapi染液，避光室温孵育10min。
3、封片：玻片置于pbs（ph7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切
片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
4、镜检拍照：切片于荧光显微镜下观察并采集图像。（dapi紫外激发波长
330-380nm，发射波长420nm，发蓝光；fitc激发波长465-495nm，发射波长
515-555 nm，发绿光；cy3激发波长510-560，发射波长590nm，发红光）
三、冰冻切片免疫荧光实验结果判读
  dapi染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，阳性表达为相应荧光素标记
的红光
上海效胜仪器有限公司是一家面向生命科学领域为企事业单位、科研机构、药
物研发和生产企业等提供高品质化学品、仪器和耗材等，是一家集贸易、科研
、服务于一体的综合性公司。
公司团队是一批有行业资深背景和丰富市场经验的专业人士组成，产品主要
应用在食品、制药 、生物医药、精细化工、新能源、新材料、环境化学、现
代农业、生物工程、生物化学等诸多领域。
     效胜作为一家集贸易、科研、服务于一体的高科技企业，在长期的销
售实践中形成了独特的市场优势：产品齐全、价格合理、经营稳健、信息反馈
及时、并能随时随地享受国外供应商最直接、最周到、最完善的售后服务。 
优势技术服务：包埋、切片、冰冻切片、he染色、masson、pas染色；免疫组
化（用本公司的抗体再加20抗体费）、全景切片扫描（白光）、tunel  、免
疫荧光，单标（一种抗体）（用本公司的抗体再加20抗体费），双标（两种抗
体）（用本公司的抗体再加20抗体费）；全景切片扫描（荧光单标）、全景切
片扫描（荧光双标）；分析（组化荧光20元、病理描述40元、测量类第一指标
20元后面指标10元）；wb：120元每个样品每个指标蛋白；pcr，第一个基因
120元每个样品，后面的基因60元每个样品；优势货源：tci、sigma、alfa、
acros、wako、岸田化学、阿拉丁、麦克林等试剂；thermo、corning、nist、
亚速旺、greiner bio-one、密理博等耗材；thermo、danaher、roche、岛津
、安捷伦、mettler-toledo、eppendorf、waters、bio-rad、perkinelmer、
日本电子、spectris、日立、lllumina、尼康、赛多利斯、奥林巴斯、松下医
疗、海尔医疗、一恒、苏净安泰；浙江拓普等仪器

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