ajinomoto ak03n说明书ips / es细胞用于临床研究的无饲养层培养基
stemfit ® ak03n
它是
临床研究的媒介，不含动物或人源成分，可以大量增加未分化的ips / es细胞。
该产品由3种溶液组成，并在使用时混合制备。
在一组中，可以制备约500ml当量的培养基。
*已经证实，应用了“源自生物来源的原料标准”的原材料不包括在厚生劳动省药品评价机构pmda的药事处。
细胞生长曲线
stemfit ®人ips细胞在ak03n（201b7股）培养的，相当长的时间周期显示出稳定的高生长速率。
用各种支架进行培养评估-511 imatrix，玻连蛋白-n，基质胶® 6孔板涂覆的人ips细胞（201b7株）stemfit ®它被证实是可能的培养与ak03n。此外，证实未分化的标志物oct 3/4（红色）和tra-1 - 60（绿色）在每个支架中是阳性的。
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克隆ips细胞stemfit ®中通过使用的培养基中培养的ips细胞，可以是基因组编辑，以及克隆。
参考书目
1）shin-il kim等人methods mol biol.2016 1357：111-31。
2）naoki ichiyanagi等人，stem cell reports。2016年4月12日; 6（4）：496-510。
确认分化能力为三个胚层stemfit ® ips细胞培养使用的培养基外胚层，中胚层分化成内胚层已被证实。
分化为胰腺内分泌细胞
stemfit ®使用ak03n介质和imatrix-511，使用上述方案在75000细胞/ cm 2，在培养23天接种后保持1231a3应变ips细胞。
到a）胰祖细胞培养13天后（pp）和23个的胰腺内分泌细胞（ec），评估oct-4，pdx-1，ins在qpcr中表达（n = 3）。基因表达是相对值，人胰岛中的表达水平为1。b）使用免疫染色评估胰岛素表达。参考文献：shahjalal hm等，al j mol cell biol。2014年10月; 6（5）：394-408
分化为心肌细胞
stemfit ®使用ak03n介质和imatrix-511，保持201b7应变ips细胞播种后板，使用上述方案制备的心肌细胞。21天后进行各种评价。
a）使用facs的ctnt阳性细胞比率测量结果。b）使用免疫染色的α-辅肌动蛋白表达的图像。比例尺：100μm。c）使用med-64测量细胞外电位的结果。在第21天将细胞粘附到涂有纤连蛋白的电极上并测量细胞外电位信号，interspike间隔，场电位持续时间（fpd）。*此数据由ips portal co.，ltd。收购和分析。
参考文献：miki等，cell stem cell，16,699,2015
分化为神经细胞
stemfit ®使用ak03n介质和imatrix-511，以5,000个细胞/厘米2，诱导分化成使用症状的方法的双重抑制smad神经干细胞接种后保持201b7应变ips细胞。神经干细胞在不包括bfgf的条件下培养17天，并诱导至神经元。
a）通过qpcr评估synapsin，neurod1表达。b）通过免疫染色证实map2的表达。比例尺= 
200μmpo：聚鸟氨酸，p：通过。n = 3与其他公司进行细胞和基因治疗进行弹射器培养试验细胞与基因治疗弹射器是促进英国细胞治疗和基因治疗领域的商业化的研究，建立了以推进企业在同一领域，它是独立的全球权威的研究机构。为了实现使用ips细胞的再生医学，我们正致力于开发具有成本效益的细胞培养系统。在该研究中，通过将ips细胞与其他公司的不同组成的培养基进行比较来进行最宜培养基的选择。其结果是，“stemfit ®ips细胞培养” ak03n，除了高细胞生长性能，基因表达的均匀性，使得不存在染色体异常，并且通过使用第三-4产物培养ips细胞比较显示出优异的特性