检测原理
试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被人冠状病毒igg抗体（coronavirus-igg）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人冠状病毒igg抗体（coronavirus-igg）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），判断样品是否含有人冠状病毒igg抗体（coronavirus-igg）。
样品收集、处理及保存方法
1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul37℃恒温箱操作注意事项
 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。  预处理后的样本无需稀释，直接取10μl加样即可。  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。  所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成
名称
96孔配置
48孔配置
备注
微孔酶标板
96孔
48孔
无
阴性对照
0.3ml
0.3ml
无
阳性对照
0.3ml
0.3ml
无
样本稀释液
6ml
3ml
无
检测抗体-hrp
10ml
5ml
无
20×洗涤缓冲液
25ml
15ml
按说明书进行稀释
底物a
6ml
3ml
无
底物b
6ml
3ml
无
终止液
6ml
3ml
无
封板膜
2张
2张
无
说明书
1份
1份
无
自封袋
1个
1个
无
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。  自动洗板机：每孔注入洗液350μl，浸泡1min，洗板5次。操作步骤
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μl；待测样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗原100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。结果判断
1.  试验有效性：阳性对照孔od值平均值≥1.00；
              阴性对照孔od值平均值≤0.15。
2.  临界值（cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3.  阴性判断：样品od值＜临界值（cut off），样品为阴性
4.  阳性判断：样品od值＞临界值（cut off），样品为阳性
试剂盒性能
准确性：阳性对照孔od值平均值≥1.00；阴性对照孔od值平均值≤0.15，说明试验结果有效。特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。重复性：板内、板间变异系数均小于15%。贮藏：2-8℃，避光防潮保存。有效期：6个月免责声明
 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。  严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。