《食品中 N-亚硝胺类的测定》的前处理方法
2023-10-15 4:49:37发布次查看发布人:
关于亚硝胺的前处理,不同基质可以采取不同的前处理,下面列举几种常用的前处理方法:
1. 按照 gb/t 5009.26-2003《食品中 n-亚硝胺类的测定》的前处理方法:
1.1 提取(水蒸馏装置蒸馏)
200 g(精确至 0.01 g)试样,加入 100 ml 水和 120 g 氯化钠于蒸馏管中,混匀;
平底烧瓶或锥形瓶中加入 4 ml 二氯甲烷及 少量冰块用以接收冷凝液;
开启蒸馏装置加热蒸馏,收集 400 ml 冷凝液后关闭加热装置,停止蒸馏;
1.2 萃取净化
在盛有蒸馏液的平底烧瓶中加入 80 g 氯化钠和 3 ml 的硫酸,搅拌溶解;
转移至 500 ml 分液漏斗中,振荡 5 min, 静置分层;
将二氯甲烷层转移至另一平底烧瓶中,再用 150 ml 二氯甲烷分三次提取水层;
合并 4 次二氯甲烷萃取液, 总体积约为 250 ml;
1.3 浓缩
将二氯甲烷萃取液用 10 g 无水硫酸钠脱水后, 进行旋转蒸发;
于 40 ℃ 水浴上浓缩至 5-10 ml 改氮吹;
准确定容至 1.0 ml,摇匀后待测定。
2. 啤酒中的亚硝胺前处理方法:按照 aoac 方法(2000),982.11 并略有改动,使用 celite 硅藻土柱并用 dcm 系统的固相 萃取方法来分离亚硝胺。
3. 橡胶材料中的亚硝胺前处理方法:
3.1 样品提取
准确称取 5.00 g (精确到 0.01 g)样品于 40 ml 棕色玻璃瓶中, 加入 30 ml 甲醇,室温超声萃取 30 min;
过滤转移溶液至 250 ml 平底烧瓶中,加入 20 ml 甲醇溶剂,重复超声 和转移步骤,并用少量甲醇洗涤棕色瓶 2-3 次,合并两次超声和洗涤溶液;
将溶液旋转蒸发(35 ℃ , 150 mbar)至 4 ml 左右,于涡旋混匀 器上充分旋转振荡 1 min,样品溶液转移至 10 ml 具塞离心管中;
另取 1 ml 甲醇分 2-3 次洗涤平底烧瓶壁,并于涡旋混匀器上 充分旋转振荡 1 min,合并洗涤液于 10 ml 具塞离心管中。
3.2 净化
c18 固相萃取小柱置于固相萃取装置上,用 5 ml 甲醇预淋洗 c 18 小柱;
将样液注入小柱,流出液收集于离心管中,待样液液面下降至小柱填料的 上层面时,再加入 5 ml 甲醇进行洗脱,收集合并全部流出液于离心管中;
3.3 浓缩
样液于 250 ml 的平底烧瓶中,并用少量甲醇淋洗离心管壁 2-3 次,合并洗涤液于平底烧瓶中;
将溶液旋转蒸发(35 ℃ , 150 mbar)至 4 ml 左右,取下平底烧瓶, 于涡旋混匀器上充分旋转振荡 1 min;
然后将平底烧瓶中的样液转移溶液至 5 ml 棕色容量瓶中。用少 量甲醇淋洗平底烧瓶 2- 3 次,并于涡旋混匀器上充分旋转振荡 1 min,合并洗涤液于棕色容量瓶中,用甲醇定容至刻度;
经 0.45 μm 滤膜过滤后进行分析。
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