neb p0704s说明书
pngase f.
目录 ＃
p0704s
浓度
500,000单位/毫升尺寸
 p0704l  75,000个单位
价格表
$ 718.00
pngase f是从糖蛋白中去除几乎所有n-连接的寡糖的最有效的酶促方法。pngase f是酰胺酶，其在高甘露糖，杂合和复合寡糖的最内部glcnac和天冬酰胺残基之间切割。
通过sds-page和完整的esi-ms测定，纯度≥95％非重组，没有可检测的内切糖苷酶f1，f2或f3污染储存在50％甘油中; 最宜活动和稳定性长达24个月可在天然或变性条件下使用优化糖蛋白的去糖基化; 使n-聚糖核心寡糖保持完整，适合进一步分析 
肽 - n-糖苷酶f，也称为pngase f，是一种酰胺酶，可裂解来自n-连接糖蛋白的高甘露糖，杂合寡糖和复合寡糖的最内层glcnac和天冬酰胺残基（1）
详细的特异性： 
当最内部的glcnac残基与α1-3岩藻糖残基连接时，pngase f不能从糖蛋白切割n-连接的聚糖。这种修饰最常见于植物和一些昆虫糖蛋白中。
产品来源
pngase f从脑膜炎黄杆菌（flavobacterium meningosepticum）（3）中纯化，不含蛋白酶和endo f活性。
提供的试剂
本产品随附以下试剂：
存储在（°c） 浓度
糖蛋白变性缓冲液 -20 10 x.
np-40 -20 10％
glycobuffer 2 -20 10 x.
应用功能
糖蛋白分析从糖蛋白中去除高甘露糖，杂合和复杂的  n-聚糖无污染物（endo f，蛋白酶等） 
单位定义
一个单位定义为在37℃下在10μl的总反应体积中在1小时内从10μg变性的rnase b中除去> 95％的碳水化合物所需的酶量。
单位定义测定：
将10μgrnaseb用1x糖蛋白变性缓冲液（0.5％sds，40mm dtt）在100℃变性10分钟。加入np-40和glycobuffer 2后，加入两倍稀释的pngase f，将反应混合物在37℃下温育1小时。通过sds-page显现反应产物的分离。
1x糖蛋白变性缓冲液
0.5％sds 
40 mm dtt 
1x np-40
1％np-40，milliq-h 2 o
反应条件
1x glycobuffer 2 
在37°c孵育
1x glycobuffer 2 
50 mm磷酸钠
（ph值@ 25°c）
贮存温度
-20℃下
储藏条件
在 25℃下，20mm tris-hcl 
50mm nacl 
5mm edta 
50％甘油
ph 7.5
热灭活
75°c，10分钟
分子量
表观：36000道尔顿
由于sds抑制pngase f活性，因此必须使np-40存在于反应混合物中。为什么这种非离子型去污剂抵消sds抑制作用目前尚不清楚。为了使天然糖蛋白去糖基化，可能需要更长的孵育时间以及更多的酶。pngase f不会切割  含有核心α1-3岩藻糖的n-连接聚糖。典型反应条件：请参阅协议