cy3实时荧光定量pcr技术，是指在pcr反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个pcr进程，后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
cy3 产品详情
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取rna，设计并合成引物，完成荧光定量pcr实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
产品名称：cy3
规格：5 mg/25 mg/50 mg
货号：bjp1116
分类：荧光定量pcr试剂盒
产品仅用于科研储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
染料法
探针法
可进行相对，定量表达分析，定性分析，snp检测等
实验报告
·电泳图 ·标准曲线
·溶解曲线 ·扩增曲线
·完整的实验过程、试剂、仪器及分析报告
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
探针法：
aqman 探针是一种寡核苷酸探针，它的荧光与目的序列的扩增相关。它与目标序列上游引物和下游引物之间的序列配对。荧光基团连接在探针的5’ 末端，而淬灭剂则在3’ 末端。当完整的探针与目标序列配对时，荧光基团发射的荧光因与3’ 端的淬灭剂接近而被淬灭。但在进行延伸反应时，聚合酶的5’ 外切酶活性将探针进行酶切，使得荧光基团与淬灭剂分离。随着扩增循环数的增加，释放出来的荧光基团不断积累。因此荧光强度与扩增产物的数量呈正比关系。相对于染料法,taqman探针法具有更高的特异性和准确性。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光pcr反应液(bc-qpcr mix)、酶混合物(enzymes mix)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的pcr反应管管数为n(n=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 n个反应加入的量
荧光pcr反应液 14µl n×14µl
酶混合物 1 µl n×1 µl
总量 15 µl n×15µl
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的n个pcr反应管中分别加入15μl荧光pcr反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(ntc)和阳性对照(bc-ptc)5μl，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qpcr反应条件
将各反应管放入定量pcr仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
pcr扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为fam。淬灭基团：none，请勿选择rox参比荧光。
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cy3amycolatopsisdecaplanina种属: amycolatopsisdecaplanina分离基物: 土壤安全等级: 1模式菌株: no培养基: 158生长条件: 28℃
marinobacter│sp.分离基物: 水样/表层海水冻干物模式菌株: no应用领域: 潜在的有机污染物降解菌/分离自石油富集菌群培养基: 821生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
coniothyrium│minitans斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 主要用于研究盾壳霉孢子形成的分子机理培养基: 14生长条件: 20℃存储条件: 真空冷冻干燥法
运动发酵单胞菌种属: zymomonas│mobilis冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 生产酒精。培养基: cm0199生长条件: 30℃存储条件: 真空冷冻干燥法
bacillus│thuringiensis冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产蛋白酶培养基: cm0002生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
bacillus│thuringiensis分离基物: 玉米螟冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 2生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
arthrobotrys│yunnanensis分离基物: 土壤斜面培养物；冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 18生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法；矿物油法
bacillus│thuringiensis冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 主要用于分类学研究培养基: 2生长条件: 30℃存储条件: 真空冷冻干燥法
saccharomyces│cerevisiae冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 酿造酒精、制面包。培养基: cm0077生长条件: 28-30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
操作程序：
由您提供该实验中目的基因的相关资料（如：基因名称、序列等信息），我们共同探讨服务的可能性和技术路线；
商定服务收费、付款方式、服务期限等，并签定技术服务合同。
有您提供实验所需的足够量的实验样本（100mg组织或107个细胞），本公司不接受您提供的rna样本
pcr所需引物/探针（如果用探针法），可以由您自己提供，也可以委托本公司设计合成（费用另计）。如果由您自己提供，必须是page纯化的高质量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探针。
我们进行rna抽提、rna定量、反转录、real-time pcr扩增、数据分析。
产品仅用于科研提供实验报告，包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。